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當前位置:首頁產品中心科研細胞細胞系SW1116 (結腸腺癌細胞)
SW1116 (結腸腺癌細胞)

產品簡介

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產品廠地:上海市
更新時間:2025-02-16
廠商性質:經銷商
訪問量:398
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品牌其他品牌貨號GOY-01X0305
規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現貨
主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產品屬性:   

產品名稱

規(guī)格

貨號

SW1116 (結腸腺癌細胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0305

商品介紹:

名稱    SW1116 (結腸腺癌細胞)    

別稱SW-1116; SW 1116

種屬人類

年齡(性別)男性,73

組織來源結腸腺癌

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述SW1116細胞CSAp陰性(CSAp-)、結腸抗原3陰性;SW1116細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。癌基因檢測表明,SW1116細胞c-myc、K-ras、H-ras、myb、sisfos的表達呈陽性,未檢測到癌基因N-mycN-ras的表達。SW1116還表達腫瘤特異的核基質蛋白CC-4、CC-5CC-6

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基Leibovitz's L-1510% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~96-144小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,100%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in nude mice.

抗原表達情況Blood Type O, Rh+

基因表達情況carcinoembryonic antigen (CEA) 2654 ng/10^6 cells/10 days; keratin

注意事項1、該細胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進行培養(yǎng),Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,會產生細胞毒性; 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培養(yǎng)基時即可正常通入5%二氧化碳; 2、配套專用培養(yǎng)基默認Leibovitz's L-15配置,如需DMEM配方,請聯(lián)系銷售下單備注更改。

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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100mL β- 巰基乙醇 β-Mercaptoethanol 室溫避光保存

50T 腦膜炎細菌多重PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

1 g 5-FITC Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   常溫保存

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