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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X1267 |
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規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 產品僅供科研使用 | 應用領域 | 化工 |
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠心臟纖維原細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1267 |
商品介紹:
名稱 小鼠心臟纖維原細胞 2.組織來源:心臟組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠心臟纖維原細胞分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細胞中粗面內質網和高爾基體均不發(fā)達。當組織受損時,纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細胞,如在組織損傷后的修復過程中,纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內質網較少,高爾基復合體不發(fā)達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網狀纖維以及基質成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成,當心肌損傷時能產生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中最常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質,并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領域研究的一個重點。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠心臟纖維原細胞采用膠原酶消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠心臟纖維原細胞經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M196 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
FGFBP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PDGF-C / SCDGF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠心臟纖維原細胞乙型肝炎二對半全套(立可讀)Anti-LIPI Antibody小鼠腦紅蛋白(NGB)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎表面抗原Anti-LMTK3 Antibody小鼠肌肉糖原化(PYGM)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎表面抗體Anti-LONP2 Antibody小鼠胰島素自身抗體(IAA)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎e抗原Anti-LPAR3 Antibody小鼠N-乙酰半乳糖-6-酯(GAS)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎e抗體Anti-LOX Antibody小鼠肝素輔助因子II(HC II)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎核心抗體Anti-LMX1B Antibody小鼠抑制素B(INHB)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎表面抗原Anti-LPAR3 Antibody小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎表面抗體Anti-LPAR5 Antibody小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa定量檢測試劑盒
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