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產(chǎn)品中心

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小鼠腎小球系膜細胞

產(chǎn)品簡介

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產(chǎn)品廠地:上海市
更新時間:2025-02-17
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:325
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品牌其他品牌貨號GOY-01X0905
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領域化工

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠腎小球系膜細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0905

商品介紹:

名稱    小鼠腎小球系膜細胞   

2.組織來源:腎組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),由系膜細胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細胞是腎小球內(nèi)非?;钴S的細胞,具有分泌細胞基質(zhì)、產(chǎn)生細胞因子、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球系膜細胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細胞的培養(yǎng)是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細胞的主要作用可能有:收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調(diào)節(jié),以影響毛細血管袢的內(nèi)壓和濾過率;支持作用,它填充于毛細血管袢之間,支持毛細血管的位置;吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì);分泌腎素,在腎缺血或免疫復合物沉積時,系膜細胞增生且分泌腎素。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞采用機械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-M057

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 CXCL9 基因全長ORF克隆

小鼠 WNT5A 基因全長ORF克隆

小鼠 TGF-beta2 基因全長ORF克隆

小鼠 TRHDE 基因全長ORF克隆

小鼠 CXCL11 基因全長ORF克隆

小鼠 CXCL1 基因全長ORF克隆

小鼠 TREM2 基因全長ORF克隆

小鼠 TNFRSF19 / TROY 基因全長ORF克隆

小鼠 CXCL15 / Lungkine 基因全長ORF克隆

小鼠 Thrombopoietin / THPO 基因全長ORF克隆

小鼠腎小球系膜細胞0.312-20 ng/mL 硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒

0.625-40 ng/mL 人Sestrin 1(SESN1)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human V(D)J recombination-activating protein 2

緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(BLEB) 英文名稱:Buffered Listeria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase

15.6-1000 pg/mL 人S100B蛋白(S100-B)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Integrin alpha-4

0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase 5

0.156-10 ng/mL 人黑素細胞蛋白PMEL(Melanocyte protein PMEL)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Glutamine synthetase

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