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產(chǎn)品中心

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大鼠胰腺導管上皮細胞

產(chǎn)品簡介

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S腺苷同型半胱(SAH或AdoHcy)連續(xù)循環(huán)比

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時間:2025-02-17
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:314
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品牌其他品牌貨號GOY-01X0755
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠胰腺導管上皮細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0755

商品介紹:

名稱    大鼠胰腺導管上皮細胞 

2.組織來源:胰腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠胰腺導管上皮細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導管上皮細胞作為胰腺前體細胞,已證實具多向分化潛能,在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細胞,胰腺導管上皮細胞轉(zhuǎn)分化的胰島樣細胞免疫原性如何,轉(zhuǎn)分化的胰島樣細胞在治療糖尿病時是否發(fā)生免疫排斥反應(yīng),對干細胞臨床治療糖尿病具有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠胰腺導管上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠胰腺導管上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R017

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 IL27Ra 基因全長ORF克隆

 CTSS 基因全長ORF克隆

 CTSL1 基因全長ORF克隆

 CCL20 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆

 CTSC / DPPI 基因全長ORF克隆

 CTSB 基因全長ORF克隆

 TNFRSF4 基因全長ORF克隆

 CystatinA 基因全長ORF克隆

 CA II 基因全長ORF克隆

 CCL21 基因全長ORF克隆

大鼠胰腺導管上皮細胞0.156-10 ng/mL 人膽汁酸受體(Bile acid receptor)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL 人干擾素誘導的跨膜蛋白3(IFITM3)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Growth hormone receptor

酸性肉湯 英文名稱:Acid Borth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

創(chuàng)傷弧菌成套生化鑒定管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9種*2套/盒*5盒

0.156-10 ng/mL 人μ阿片受體(M-OR-1)ELISA試劑盒

YPDA培養(yǎng)基 英文名稱:YPDA Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.625-40 ng/mL 人組織蛋白去乙?;?(HDAC8)ELISA試劑盒

DNA瓊脂 英文名稱:DNase Agar 產(chǎn)品規(guī)格:100

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Testican-2

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