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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠浦肯野細(xì)胞
大鼠浦肯野細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

大鼠浦肯野細(xì)胞的相關(guān)*:小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)免疫試劑盒*直銷
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時(shí)間:2025-02-18
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:410
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品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X1419
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

大鼠浦肯野細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1419

商品介紹:

名稱    大鼠浦肯野細(xì)胞 

2.組織來(lái)源:小腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠浦肯野細(xì)胞分離自小腦皮質(zhì)組織;小腦的表面被覆著一層灰質(zhì),叫小腦皮質(zhì),小腦皮質(zhì)分為3層,從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核。浦肯野細(xì)胞(Purkinje cell)是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動(dòng)的神經(jīng)元。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬(wàn)個(gè)浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng),傳導(dǎo)速度快,可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,具有舒張期自動(dòng)除極化的性能,因而有自律性,但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞。這類細(xì)胞常常平行排列,細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。小腦:浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中最大的神經(jīng)元,細(xì)胞體呈梨形,頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹(shù)突,向外伸入分子層。主樹(shù)突沿途分支繁茂,形如展開(kāi)的、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長(zhǎng)軸垂直的平面上。樹(shù)突分支上有大量的樹(shù)突棘,與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系,接受傳入小腦的全部信息。軸突由細(xì)胞底部(與主樹(shù)突相對(duì)方向)發(fā)出,細(xì)長(zhǎng),離開(kāi)胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維,向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開(kāi)皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個(gè)浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個(gè)終末膨大,約與小腦深部核團(tuán)的35個(gè)神經(jīng)元形成突觸。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列,幾個(gè)細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個(gè)小束,小束外包繞著基底膜。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少,胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網(wǎng),細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無(wú)橫管系統(tǒng),但膜電容比收縮細(xì)胞大,可能是由于其閏盤(pán)結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細(xì)胞閏盤(pán)的主要成分是縫隙連接,粒著膜占的比例很少,這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠浦肯野細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠浦肯野細(xì)胞經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含脂質(zhì)濃縮液、BSAMonothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R319

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性不增殖;不傳代

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 FAP / Seprase 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 Cathepsin-B / CTSB 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 GPNMB / HGFIN 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

大鼠 IL1R1 / CD121a 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 uPAR / CD87 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 CLEC3B / Tetranectin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

大鼠浦肯野細(xì)胞Bacillus subtilis subsp. subtilis尼克酰腺嘌呤二核苷酸氧化5檢測(cè)試劑盒

Bacillus subtilis subsp. subtilis低氧誘導(dǎo)因子-1β檢測(cè)試劑盒

Bacillus subtilis subsp. subtilis白介素38抗體檢測(cè)試劑盒

Bacillus subtilis subsp. subtilisCD27分子檢測(cè)試劑盒

Bacillus pumilusDeltaFosB檢測(cè)試劑盒

Bacillus pumilus異戊烯基腺嘌呤核苷檢測(cè)試劑盒

Bacillus pumilus生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ檢測(cè)試劑盒

Bacillus pumilus球蛋白k可變1D-13檢測(cè)試劑盒


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