細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

人原代食管纖維瘤細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代皮食管纖維瘤細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代食管纖維瘤細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代食管纖維瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原 0.5mgER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)

IgG1 Protein Human 重組人 IgG1 Fc 蛋白

CD48重組大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD99 Protein Mouse 重組小鼠 CD99 / PILR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CD4重組人 CD4 / LEU3 蛋白 (aa 1-208, His 標(biāo)簽) Protein

大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制因子(Vaspin)試劑盒 ，英文名： Vaspin ELISA Kit

Monkey ierferon gamma (IFN- gamma) ELISA Kit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒

Ratlipoproteinα,Lp-αELISAKit 大鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGlyCAM-1(Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1)ELISAKit人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子

細(xì)胞非蛋白/游離巰基含量熒光定量試劑盒20次

RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒規(guī)格：96T/48T

雙向調(diào)節(jié)蛋白   英文名稱：   Amphiregulin   規(guī)格：      英文縮寫：   AR

固   英文名稱：   Aldosterone   規(guī)格：      英文縮寫：   Aldosterone

白細(xì)胞活化黏附因子   英文名稱：   Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule   規(guī)格：      英文縮寫：   ALCAM

膜聯(lián)蛋白5   英文名稱：   Annexin 5   規(guī)格：      英文縮寫：   ANXA-5

豚鼠胰島素樣生長因子2(IGF2)試劑盒 ，英文名： IGF2 ELISA Kit

Human Chlamydia pneumoniae aibody (Cpn-Ab) ELISA Kit 人肺衣原體抗體(Cpn-Ab)試劑盒

rabbitmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBcl3(humanB-cellleukemia/lymphoma3)ELISAKit人B細(xì)胞淋巴瘤因子3

纖維蛋白溶酶(PLASMIN)活性比色法定量試劑盒20次

RabbitCoisolELISAKit兔子(Coisol)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FITC標(biāo)記人CD68單克隆抗體

核糖體蛋白S4Y抗體

人原代食管纖維瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基CD48重組大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原 0.5mgER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)

CD4重組人 CD4 / LEU3 蛋白 (aa 1-208, His 標(biāo)簽) Protein

IgG1 Protein Human 重組人 IgG1 Fc 蛋白

CD99 Protein Mouse 重組小鼠 CD99 / PILR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)