細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

兔原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代椎體終板軟骨細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代椎體終板軟骨細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代椎體終板軟骨細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

lamin A 核纖層蛋白A抗原 0.5mglamin A 核纖層蛋白A抗原

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

REG1A重組食蟹猴 REG1A / PSPS 蛋白 Protein

IgG2b Protein Mouse 重組小鼠 IgG2b-Fc 蛋白

SELL重組人 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein

大鼠鞘醇-1-0酸0酸酶1(SGPP1)試劑盒 ，英文名： SGPP1 ELISA Kit

Mouse angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 小鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒

Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGS(HumanGelsolin)ELISAKit人凝溶膠蛋白

細胞單胺氧化酶(MAO)總活性熒光定量試劑盒20次

Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠三甲狀腺原(T3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔抗糖蛋白抗體試劑盒   兔抗糖蛋白抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔抗糖蛋白抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔抗糖蛋白抗體試劑盒、兔抗糖蛋白抗體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔抗平滑肌抗體試劑盒   兔抗平滑肌抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔抗平滑肌抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔抗平滑肌抗體試劑盒、兔抗平滑肌抗體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔抗試劑盒   兔抗試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔抗試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔抗試劑盒、兔抗試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔抗腦組織抗體試劑盒   兔抗腦組織抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔抗腦組織抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔抗腦組織抗體試劑盒、兔抗腦組織抗體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠KN-62 試劑盒 96T/48T

Rat dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)試劑盒

Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 人促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCollageypeⅣ,ColⅣ試劑盒人Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織5-焦0酸甲戊二羥酸脫羧酶(mevalonate5-pyrophosphatedecarboxylase)活性比色法定量試劑盒20次

humaeceptoNFRSF-ieractingserine-threoninekinase2,RIPK2ELISAKit人受體TNFRSF結合絲蘇激酶2(RIPK2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

B淋巴細胞白血病前體蛋白轉錄因子3抗體

富含亮重復蛋白8B抗體

兔原代椎體終板軟骨細胞專用培養(yǎng)基GAD2重組小鼠 GAD65 / GAD2 蛋白 Protein

骨成型蛋白4(BMP4)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)

SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 標簽)