021-39921927
產品簡介
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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X0132 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 產品僅供科研使用 | 應用領域 | 化工 |
公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | KLE (子宮內膜癌細胞) |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X0132 |
產品介紹：
名稱 KLE (子宮內膜癌細胞) 別稱CVCL_1329 種屬人類 年齡（性別）女性，64歲 組織來源子宮；子宮內膜 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述KLE細胞是源自一名64歲白人女性的子宮內膜腫瘤組織，由G·R·Richardson于1984年建系。KLE細胞染色體為非整倍體，數目范圍在51-66之間。KLE細胞裸鼠植瘤后，其腫瘤標本在電鏡下顯示，細胞間見緊密相連，細胞表面具有微絨毛。KLE細胞形態(tài)特征與孕激素刺激后的子宮內膜相似。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM/F12＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~114小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. 抗原表達情況Blood Type O; Rh+ |
細胞特點及處理：
產品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備。 2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。 | 細胞處理： 1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法： 1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細胞培養(yǎng)技巧：
一、凍存時的注意事項： 1. 在冷凍保存之前，應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高，凍存的細胞密度為80 – 90 ％最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質，例如是否有雜細胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級，以5~10 ml 小體積分裝，4 度避光保存，勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級，以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細胞濃度： 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，細胞濃度不要太高，某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6，依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 ％ DMSO，若是不確定細胞之冷凍條件，在做冷凍保存之同時，亦應作一個backup culture，以防止冷凍失敗。
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KLE (子宮內膜癌細胞) 2500U 9°N DNA 連接（9°N DNA Ligase) 9°N DNA Ligase -20℃保存
100mL POPSO Buffer，0.2M,pH7.0 POPSO Buffer，0.2M,pH7.0 常溫保存
100µg 人基因組DNA混合液 Human Genomic DNA Mix 4℃保存
2 ug pQE-70 pQE-70 低溫運輸，-20℃保存
肉湯 20支
2 ug pCAMBIA1302 pCAMBIA1302 低溫運輸，-20℃保存
3%氯化鈉三糖鐵(TSI)瓊脂 3%TSI Agar 250g
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次； 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化； 3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。 |
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