商品屬性：

人原代食管癌相關(guān)成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代食管癌相關(guān)成纖維細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代食管癌相關(guān)成纖維細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用人原代食管癌相關(guān)成纖維細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)重組蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)

ADAM12 Protein Human 重組人 ADAM12 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein

GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group P, strain RBF168)

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠果糖二0酸縮酶A(ALDOA)試劑盒 ，英文名： ALDOA ELISA Kit

Rat apoptosis inducing protein BH3 domain (Bid) ELISA Kit 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)試劑盒

RatToll-likereceptor4,TLR4ELISAKit 大鼠Toll樣受體4(TLR4)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforENA-78/CXCL5(HumanEpithelialneuophilactivatingpeptide78)ELISAKit人上皮粒細胞活化肽78

細胞鎂離子濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次

RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒

植物RNA提取試劑盒(溶液法）   24ml

PlanNAplus   40ml

質(zhì)粒大量提取試劑盒   5T

PlasmidMaxiKit   10T

植物D3(VD3)ELISA 試劑盒

Human ai liver cytosolaibody type 1 (LC1) ELISA Kit 人抗肝細胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)試劑盒

Porcinegrowthhormone,GHELISAKit 豬生長激素(GH)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAFP-L1ELISAKit小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1

血液E高效液相色譜法定量試劑盒20次

Mousethrombospondin1,TSP-1ELISAKit小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒

S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體

信號通路Wnt4單克隆抗體

人原代食管癌相關(guān)成纖維細胞專用培養(yǎng)基CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein

血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)重組蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ADAM12 Protein Human 重組人 ADAM12 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GP140 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group P, strain RBF168)

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。