小鼠肺泡巨噬細(xì)胞的相關(guān)*:NINHYDRIN蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒 100次NITRATION蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒 100次FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒 100次二苯胺(DPA)DNA比色定量測定試劑盒 10次二氨基苯甲酸(DABA)DNA比色定量測定試劑盒 20次鋱鹽(terbiumIII)單鏈DNA熒光定量測定試劑盒 20次
產(chǎn)品分類
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X1151 |
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規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1151 |
商品介紹:
名稱 小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 2.組織來源:肺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 小鼠肺泡巨噬細(xì)胞分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲存器官,為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。 5.方法簡介: 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺泡巨噬細(xì)胞采用機(jī)械研磨結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺泡巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M152 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)巨噬細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
TERF1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
PIK3R1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SELL 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CCNE2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CEACAM8 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CD207 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
ITLN1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CD300C 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
GH2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
BRI3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞棉子糖發(fā)酵管-O157菌生化鑒定 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支
我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱:Wagstsuma Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Myc box-dependent-interacting protein 1
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(II) chain
Bolton肉湯 英文名稱:Boltom Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human UPF0556 protein C19orf10
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Transcription factor 7-like 2
0.156-10 ng/mL 人TNF受體相關(guān)因子6(TNF receptor-associated factor 6)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(Cardiac MyBP-C)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人肌細(xì)胞生成素(Myogenin)ELISA試劑盒
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