細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

大鼠原代胸腺上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代胸腺上皮細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代胸腺上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代胸腺上皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產(chǎn)品：

血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)重組蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)

ANGPTL5 Protein Human 重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CEACAM6重組人 CEACAM6 / CD66c 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Spike Protein Human coronavirus 重組人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)試劑盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit

Rabbit urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒

漢坦病毒Ⅰ型(HTV-Ⅰ)核酸試劑盒(-PCR法) 48T

CLIAKitforMousec-junELISAKit小鼠c-jun

體液氧化酶活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKit16-αOHE-1人16α羥基雌同1

豬腸三葉因子試劑盒   豬腸三葉因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬腸三葉因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬腸三葉因子試劑盒、豬腸三葉因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬白介素1試劑盒   豬白介素1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬白介素1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬白介素1試劑盒、豬白介素1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

雞極低密度脂蛋白試劑盒   雞極低密度脂蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   雞極低密度脂蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：雞極低密度脂蛋白試劑盒、雞極低密度脂蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

雞5核苷酸酶試劑盒   雞5核苷酸酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   雞5核苷酸酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：雞5核苷酸酶試劑盒、雞5核苷酸酶試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬核轉(zhuǎn)錄因子kb-p65(NF-kB p65)ELISA 試劑盒

Human desmin (Des) ELISA Kit 人結(jié)蛋白(Des)試劑盒

PorcineC-reactiveprotein,CRPELISAKit 豬C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha-Gal(MouseAlpha-galactoyl)ELISAKit小鼠α半乳糖基抗原

血液結(jié)合(酯化)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Placalmodulin,CAMELISAKit植物鈣調(diào)素(CAM)試劑盒

LYPD1蛋白抗體

氧化酶IV亞型1（內(nèi)參）單克隆抗體

大鼠原代胸腺上皮細胞專用培養(yǎng)基CEACAM6重組人 CEACAM6 / CD66c 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)重組蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ANGPTL5 Protein Human 重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

Spike Protein Human coronavirus 重組人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 標(biāo)簽)

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。