細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

小鼠原代主動脈弓內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代主動脈弓內(nèi)皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代主動脈弓內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代主動脈弓內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產(chǎn)品：

phospho GAP-43(pSer41 0.5mgphospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神經(jīng)生長相關蛋白43抗原

BIN2 Protein Human 重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 標簽)

NA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽) Protein

CNTN2 Protein Human 重組人 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 標簽)

SETD8重組人 SETD8 / PR-Set7 蛋白 Protein

大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)試劑盒 ，英文名： EPOR ELISA Kit

Rabbit lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 兔淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒

漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeIcollagen,ICTPELISAKit小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽

體液環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKit17-KS人17-同類固醇

豬血纖蛋白原試劑盒   豬血纖蛋白原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬血纖蛋白原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬血纖蛋白原試劑盒、豬血纖蛋白原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒   豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒、豬血栓調(diào)節(jié)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬血管性血友病因子試劑盒   豬血管性血友病因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬血管性血友病因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬血管性血友病因子試劑盒、豬血管性血友病因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬血管細胞粘附分子-1試劑盒   豬血管細胞粘附分子-1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬血管細胞粘附分子-1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬血管細胞粘附分子-1試劑盒、豬血管細胞粘附分子-1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒

Human maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒

RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforai-HAV(Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody)ELISAKit人抗甲型肝病毒IgM抗體

血液D-乳酸比色法定量試劑盒20次

PorcineHistamine,HISELISAKit豬組胺(HIS)試劑盒

Kelch樣蛋白14抗體

細胞分裂周期蛋白25抗體

小鼠原代主動脈弓內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基NA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽) Protein

phospho GAP-43(pSer41 0.5mgphospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神經(jīng)生長相關蛋白43抗原

SETD8重組人 SETD8 / PR-Set7 蛋白 Protein

BIN2 Protein Human 重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 標簽)

CNTN2 Protein Human 重組人 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 標簽)

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。