膽管癌組織源細(xì)胞的相關(guān)*:組織乙酰酯活性比色法定量檢測試劑盒 20次血液乙酰酯活性比色法定量檢測試劑盒 20次體液乙酰酯活性比色法定量檢測試劑盒 20次乙酰酯活性抑制劑篩選比色法檢測試劑盒 20次通用型乙酰酯活性熒光法定量檢測試劑盒 20次細(xì)胞乙酰酯活性熒光法定量檢測試劑盒 20次
產(chǎn)品分類
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X1123 |
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規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
膽管癌組織源細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1123 |
商品介紹:
名稱 膽管癌組織源細(xì)胞 2.組織來源:膽管癌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 人膽管癌組織源細(xì)胞分離自癌組織;癌(cancer)是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,是惡性腫瘤中最常見的一類。相對應(yīng)的,起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名,如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征,其發(fā)生是一個多因子、多步驟的復(fù)雜過程,分為致癌、促癌、演進(jìn)三個過程,與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細(xì)胞,是一種變異的細(xì)胞,是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同,有無限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點,能夠無限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織。癌細(xì)胞除了分裂失控外(能進(jìn)行多極分裂),還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。 5.方法簡介: 實驗室分離的癌組織源細(xì)胞采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的人膽管癌組織源細(xì)胞經(jīng)檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H142 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
IL17A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
大鼠 GM-CSF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
小鼠 LIGHT / TNFSF14 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
CD36 / SCARB3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
BAFF / TNFSF13B 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TGF-beta2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
TNRC6A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
PKC nu / PRKD3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
小鼠 CLEC11A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
小鼠 IL7 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
膽管癌組織源細(xì)胞0.312-20 ng/mL 人自噬蛋白1(BECN1)ELISA試劑盒
1.56-100 mIU/L 人胱天蛋白14(CASP14)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人11β羥基類固醇脫氫1型(HSD11b1) ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 3B
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Neuronal-specific septin-3
0.312-20 ng/mL 人Ras同系物家族成員C(Rho-related GTP-binding protein RhoC)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Complement C5
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Axin-2
31.2-2000 pg/mL 牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.312-20 ng/mL 人FK506結(jié)合蛋白5(FKBP5)ELISA試劑盒
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