細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

小鼠原代B淋巴細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持小鼠原代B淋巴細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產品中已包含小鼠原代B淋巴細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代B淋巴細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產品：

TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)

CNPY3 Protein Human 重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標簽)

Spike重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標簽) Protein

NTRK3 Protein Human 重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標簽)

IL10RB重組人 IL10Rb 蛋白 Protein

大鼠間羥(MN)試劑盒 ，英文名： MN ELISA Kit

Mouse tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒

RatADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFETU-A(HumanFetuinA)ELISAKit人胎球蛋白A

細胞基質金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次

RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠絨毛膜(CG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠二(MDA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠C肽(C-Peptide)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit E(IgE)試劑盒

HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit 人水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Equineamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40試劑盒馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量試劑盒20次

MouseCrosslaps,CrELISAKit小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒規(guī)格：96T/48T

AF647標記的信號轉導和轉錄激活因子5抗體

趨化因子26/嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體

小鼠原代B淋巴細胞專用培養(yǎng)基Spike重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標簽) Protein

TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)

IL10RB重組人 IL10Rb 蛋白 Protein

CNPY3 Protein Human 重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標簽)

NTRK3 Protein Human 重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標簽)

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。