細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

人原代羊膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代羊膜上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代羊膜上皮細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代羊膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產(chǎn)品：

端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)重組蛋白 Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)

IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

S100B重組小鼠 S100B / S100beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL17RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

DDR2重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein

大鼠抗利尿激素(ADH)試劑盒 ，英文名： ADH ELISA Kit

Monkey heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒

RatannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFSELISAKit大鼠卵泡抑素

細(xì)胞氧化酶活性熒光定量試劑盒20次

Ratplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白   英文名稱：   eosinophil cationic protein   規(guī)格：      英文縮寫：   ECP

表皮生長因子   英文名稱：   epidermal growth factor   規(guī)格：      英文縮寫：   EGF

表皮生長因子受體   英文名稱：   epidermal growth factor receptor   規(guī)格：      英文縮寫：   EGFR

表皮生長因子受體   英文名稱：   epidermal growth factor receptor   規(guī)格：      英文縮寫：   EGFR

豚鼠血清總補體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hepatitis E virus IgG (HEV-IgG) ELISA Kit 人戊型肝病毒IgG(HEV-IgG)試劑盒

Humanα-Endomorphin,α-EPELISAKit 人α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCP試劑盒人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織D-葡萄糖氧化法定量試劑盒20次

humanProstaglandinE1，PG-E1ELISAKit人前列腺素E1(PGE1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

白介素-22抗體

磷脂酰肌醇激酶抗體

人原代羊膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基TCN2重組小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 Protein

白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)

B3GNT2重組人 B3GNT2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。