021-39921927
產(chǎn)品簡介
小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*：組織甘油-3-脫氫-1（Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1）活性光譜法定量檢測試劑盒 20次細(xì)胞甘油-3-脫氫-2（Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2）活性比色法定量檢測試劑盒 20次組織甘油-3-脫氫-2（Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2
產(chǎn)品分類
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | GOY-01X0917 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0917 |
商品介紹：
名稱 小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 2.組織來源：腎動(dòng)脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自腎動(dòng)脈組織；腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動(dòng)脈，進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯集成出球小動(dòng)脈，出腎小體。直小動(dòng)脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動(dòng)脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機(jī)能血管，與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個(gè)毛細(xì)血管網(wǎng)：腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是腎動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M061 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 LCN2 / NGAL 基因全長ORF克隆
小鼠 MCSFR / CSF1R 基因全長ORF克隆
小鼠 Integrinalpha11 基因全長ORF克隆
小鼠 MEP1A 基因全長ORF克隆
小鼠 sFRP-5 基因全長ORF克隆
小鼠 IL34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
小鼠 Integrinbeta1 基因全長ORF克隆
小鼠 sFRP-4 基因全長ORF克隆
小鼠 SCARB2 基因全長ORF克隆
小鼠 LGMN / AEP 基因全長ORF克隆
小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人白介素17受體B(IL17RB)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, testis-specific form, mitochondrial
0.156-10 ng/mL 人線粒體假定ATP依賴Clp蛋白水解蛋白亞基(CLPP)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Interleukin-13 receptor subunit alpha-2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Type II iodothyronine deiodinase
萬古0.66mg 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：0.66mg*5
0.156-10 ng/mL 人整合素α5(ITA5)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人活化凝血因子Ⅻa(FⅫa)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class II histocompatibility antigen gamma chain
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