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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系NCCIT (畸胎癌細(xì)胞)
NCCIT (畸胎癌細(xì)胞)

產(chǎn)品簡介

NCCIT (畸胎癌細(xì)胞) 的相關(guān)*:(包括標(biāo)記探針)
3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移標(biāo)記試劑盒 10次
生物素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒 20次
生物素凝膠遷移電泳印跡轉(zhuǎn)移試劑盒 5次
生物素化學(xué)底物復(fù)合試劑盒 5次
通用型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒 10次

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時(shí)間:2025-02-27
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:265
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌貨號GOY-01X0625
規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

NCCIT (畸胎癌細(xì)胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0625

商品介紹:

名稱    NCCIT (畸胎癌細(xì)胞)  

別稱NCC-IT

種屬人類

年齡(性別)男性,24

組織來源多能性胚胎癌;畸胎癌

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述NCCIT was established by Shinichi Teshima (National Cancer Institute, Tokyo, Japan) in 1985 from a mediastinal mixed germ cell tumor.

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1%P/S

推薦傳代比例1:4-1:8

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

致瘤性Yes, Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 107 cells.

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 PI3 基因全長ORF克隆

 PDE4D 基因全長ORF克隆

 IL20RB 基因全長ORF克隆

 LSAMP 基因全長ORF克隆

 MAPK15 基因全長ORF克隆

 MED1 基因全長ORF克隆

 FGFBP2 基因全長ORF克隆

 EDN3 基因全長ORF克隆

 C5AR1 基因全長ORF克隆

 PARP11 基因全長ORF克隆

NCCIT (畸胎癌細(xì)胞) 霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1000(ML)

0.312-20 ng/mL 鼠疫桿菌(YP)核酸檢測試劑盒

0.156-10 ng/mL 羥賴(Hydroxylysine)ELISA試劑盒

B(1萬單位) 英文名稱:Polymyxin B 產(chǎn)品規(guī)格:1萬單位*5支

-心浸萃瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Brain-extracted agar Baptist Heart 產(chǎn)品規(guī)格:250g

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) 英文名稱:Maconkey Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

XLT4瓊脂 英文名稱:XLT4 Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

NA平板(加青)(9cm) 英文名稱:Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包

78-5000 pg/mL 人粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 禽白血病病毒(ALV)核酸檢測試劑盒

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