細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

兔原代肺微血管周細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代肺微血管周細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代肺微血管周細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代肺微血管周細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

促胰液素(SCT)重組蛋白 Recombinant Secretin (SCT)

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽)

ART4重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白  Protein

IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽) Protein

大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ 1-42)試劑盒 ，英文名： Aβ 1-42 ELISA Kit

Mouse follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit 小鼠促卵泡素(FSH)試劑盒

ELISA 小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1(HumanIerleukin1)ELISAKit人白介素1

通用型離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒50次

ELISAKitACE大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶

纖溶酶原激活劑抑制因子1   英文名稱：   Human Plasminogen Activator Inhibitor 1   規(guī)格：      英文縮寫：   PAI-1

纖溶酶原激活劑抑制因子2   英文名稱：   Human Plasminogen Activator Inhibitor 2   規(guī)格：      英文縮寫：   PAI2

血小板活化因子受體   英文名稱：   Human Platelet Activating Factor Receptor   規(guī)格：      英文縮寫：   PAFR

血小板衍生生長(zhǎng)因子c   英文名稱：   Human Platelet Derived Growth Factor C   規(guī)格：      英文縮寫：   PDGF-C

小鼠氧化酶(DAO)ELISA 試劑盒

Human mitogen activated protein kinase /MAP kinase (MAPK) ELISA Kit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)試劑盒

Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit 人血紅蛋白β亞基(HB-β)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAprotinin,AP試劑盒人(AP)試劑盒

植物乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量試劑盒20次

Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase1，TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒

STAC2蛋白抗體

細(xì)胞周期蛋白G相關(guān)激酶抗體

兔原代肺微血管周細(xì)胞專用培養(yǎng)基ENPP2重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta 0.5mgActin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動(dòng)蛋白(抗原)

ANTXR1重組人 ANTXR1 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽)

ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)