細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

小鼠原代心肌細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代心肌細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代心肌細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代心肌細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

RNA結(jié)合基元蛋白24(RBM24)重組蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24)

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

KLRB1F重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白  Protein

SELP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GIF重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠β-防御素(β-Defensins)試劑盒 ，英文名： β-Defensins ELISA Kit

Rabbit immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 兔子免疫球蛋白M(IgM)試劑盒

ELISA 小鼠骨鈣素(mouse Osteocalcin)  進口分裝

CLIAKitforIL-10mouseElisaKit小鼠白介素10

通用型密執(zhí)安棒狀桿菌壞腐亞種(Clavibactermichiganensissubsp.sepedonicus;Cms)試劑盒20次

ELISAKitVEGF-C大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C

總蛋白定量測試盒（帶標(biāo)準；考馬斯亮蘭法）   Total protein quaitative test kit (with standard; Coomassie brillia blue method)

總蛋白定量測試盒（帶標(biāo)準；考馬斯亮蘭法）   Total protein quaitative test kit (with standard; Coomassie brillia blue method)

蛋白標(biāo)準品（總蛋白、白蛋白）   Protein standard (total protein, albumin)

微量游離血紅蛋白測試盒   ace free hemoglobin test case

豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒

Human erythropoiesis stimulating factor (ESF) ELISA Kit 人紅細胞刺激因子(ESF)試劑盒

Rabbitmaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforApl/APA(Humanai-phospholipidaibody)ELISAKit人抗0脂抗體

血清/血漿總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit豬白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒

SC5DL蛋白抗體

細胞色素P450 2J3抗體

小鼠原代心肌細胞專用培養(yǎng)基NXPH1重組小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein (UBE1L)

PFN2重組人 Profilin 2 / PFN2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IGFBP2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)