細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

大鼠原代軟骨細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代軟骨細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代軟骨細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代軟骨細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2 0.5mgSLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0酸協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗原

ARF1 Protein Human 重組人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 (His 標簽)

HDAC4重組人 HDAC4 蛋白 (aa 612-1084) Protein

MERTK Protein Human 重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標簽)

AGO1重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 ，英文名： IFI16/p16 ELISA Kit

Rabbit soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒

ELISA 小鼠巨嗜細胞性蛋白-2(mouse MIP-2)  進口分裝

CLIAKitforIL1Ra(MouseIerleukin1receptoraagonist)ELISAkit小鼠白介素1受體拮抗劑

通用型賴(lysine)含量化學比色法定量試劑盒20次

ELISAKitNO大鼠血清

豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬抗受體(A)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒

Human anapastic lymphoma kinase (ALK) ELISA Kit 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)試劑盒

PorcinelisteriolysinELISAKit 豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAMPKELISAKit魚0酸化腺苷酸活化蛋白激酶

血液胱(cystine)含量比色法定量試劑盒20次

PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒

ORC6蛋白抗體

天青素/肝素結(jié)合蛋白單克隆抗體

大鼠原代軟骨細胞專用培養(yǎng)基HDAC4重組人 HDAC4 蛋白 (aa 612-1084) Protein

SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2 0.5mgSLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0酸協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗原

AGO1重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標簽) Protein

ARF1 Protein Human 重組人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 (His 標簽)

MERTK Protein Human 重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標簽)