細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

小鼠原代視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

瘦素(LEP)重組蛋白 Recombinant Leptin (LEP)

CD97 Protein Human 重組人 CD97 蛋白

IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

SCGB3A1重組人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠白細胞介素13(IL-13)試劑盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit

Phaseolus vulgaris agglinin (PHA) ELISA Kit 菜豆凝集素(PHA)試劑盒

MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAkit 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanNeuroglobin,NGBELISAKit人腦紅蛋白

銅蛋白電泳染色試劑盒10次

sRANKL大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基

小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠黑色素細胞抗體(MCAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲狀腺素(T4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠仙臺病毒抗體(HVJ-Ab)試劑盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒

Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70試劑盒雞熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞CDK3蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒規(guī)格：96T/48T

苯二氮卓單小鼠單抗

磷酸化Disabled 1抗體

小鼠原代視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

瘦素(LEP)重組蛋白 Recombinant Leptin (LEP)

SCGB3A1重組人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD97 Protein Human 重組人 CD97 蛋白

HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白