細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

小鼠原代滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

COMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原 0.5mgCOMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原

CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白

SELP重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

SELL Protein Mouse 重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白

ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 Protein

大鼠釋放激素受體抗體(GHR-Ab)試劑盒 ，英文名： GHR-Ab ELISA Kit

Porcine ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒

ELISA 小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(mouse BCL-2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLLO(HumanlisteriolysinO)ELISAKit人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O

通用型DNA氧化損傷AP位點(diǎn)比色法定量分析試劑盒20次

ELISAKitPAL雞L苯解氨酶

血小板膜糖蛋白 (GP IIb/IIIa)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

生長相關(guān)因子 (GRO)    作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

生長相關(guān)因子 α(GRO α)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

過氧化物酶 (GSH-Px)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA 試劑盒 96T/48T

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HumanArachidonicAcid,AAELISAKit 人花生四烯酸(AA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforABCA1(HumanATP-bindingcassetteanspoerA1)ELISAKit人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1

伊文思藍(lán)(EVANSBLUE)植物細(xì)胞繁殖測定試劑盒100次

Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit小鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

整合素α4（CD49d）抗體

Symplekin蛋白抗體

小鼠原代滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基SELP重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

COMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原 0.5mgCOMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原

ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 Protein

CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白

SELL Protein Mouse 重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白