細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

牛原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持牛原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含牛原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于牛原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

簇集蛋白(CLU)重組蛋白 Recombinant Clusterin (CLU)

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

ITK重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標(biāo)簽) Protein

CD83 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD83 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MBL2重組人 MBL2 / MBL / COLEC1 蛋白 Protein

小鼠β酚(β-naphthol)LISA 試劑盒

Human vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 人B12(VB12)試劑盒

Humanai-cailage-aibodyELISAKit 人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCenomereProtein,CENP-B試劑盒人著絲粒蛋白B(CENP-B)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米MON809品系試劑盒20次

HumanSerumamyloidA，SAAELISAKit人血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人阻抑素(PHB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human PHB (Prohibitin) ELISA Kit

人隱花色素1(CRY1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit

人優(yōu)球蛋白(EL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit

人信號素4D(SEMA4D)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit

豚鼠壞死因子α(TNFα)試劑盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit

Lung resistance protein (LRP) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒

rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBCR(HumanBcellreceptor)ELISAKit人B細(xì)胞受體

仙客來培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISAKit兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

DYDC1蛋白抗體

S轉(zhuǎn)移酶ω2抗體

牛原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基ITK重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標(biāo)簽) Protein

簇集蛋白(CLU)重組蛋白 Recombinant Clusterin (CLU)

MBL2重組人 MBL2 / MBL / COLEC1 蛋白 Protein

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

CD83 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD83 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)