反應(yīng)五要素:
豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

DAABD-Cl分子式：304.75分子量： C10H13ClN4O3S英文名稱：daabd CLCAS號：664985-43-7

1-正丁-4[(4-甲氧)乙炔]分子式：264.36分子量： C19H20O英文名稱：1- butyl -4[(4-) - phenyl groupCAS號：35684-12-9

1,4-雙(4-氧)分子式：292.33分子量： C18H16N2O2英文名稱：1,4- bis (4-) benzeneCAS號：581437

2-氟-5-(三氟甲)吡分子式：165.09分子量： C6H3F4N英文名稱：2- -5- (three) pyridineCAS號：69045-82-5

2-氯-5-吡分子式：138.55分子量： C6H3ClN2英文名稱：2- chloro -5- cyanopyridineCAS號：33252-28-7

東莨菪素英文名稱：ScopoletinCAS號：92-61-5分子式：192.168分子量：C10H8O4

2--4-氯嘧分子式：129.55分子量： C4H4ClN3英文名稱：2- amino -4-CAS號：3993-78-0

1-甲氧萘分子式：158.2分子量： C11H10O英文名稱：1- methyl groupCAS號：2216-69-5

間-雙溴甲分子式：421.75分子量： C6H4(CHBr2)2英文名稱：Inter - bisCAS號：36323-28-1

2-*硅噻唑分子式：157.31分子量： C6H11NSSi英文名稱：2- three trimethylsilyl thiazoleCAS號：79265-30-8

5--2,2-二氟-1,3-并二噁唑分子式：173.12分子量： C7H5F2NO2英文名稱：5- -2,2- two -1,3- fluorine amino benzene and two oxazoleCAS號：1544-85-0

豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核酸檢測試劑盒方法EGF  小鼠抗表皮生長因子抗體 0.1ml

Protein A  重組金黃色葡萄球菌蛋白A抗體 0.1ml

phospho-Dnmt1(Ser154)  磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.1ml

IFN-Beta  干擾素β抗體 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml

hnRNP R  異質(zhì)性核糖核蛋白R 0.2ml

LCA5  致盲基因LCA5蛋白抗體 0.2ml

PRKCDBP  蛋白激酶C delta結(jié)合蛋白抗體 0.2ml

SMURF1  Smad蛋白E3泛素連接酶1抗體 0.2ml

phospho-FAK(Ser732)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml

COX4NB  COX4NB蛋白抗體 0.2ml

Phospho-Histone H3 (Thr3)  磷酸化組蛋白H3抗體 0.1ml