細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

Calu-1細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持Calu-1細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含Calu-1 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于Calu-1細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

McCoy’s 5A 培養(yǎng)基                    445 mL

特級胎牛血清                             50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠I型膠原蛋白(COL-1)pcr檢測試劑盒

Rat deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒

HumanDihydrotestosterone,DHTELISAKit 人雙輕睪酮(DHT)pcr檢測試劑盒分裝

HumanCollagenaseI試劑盒人膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織5-羥色胺-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量試劑盒20次

Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠鞘醇-1-0酸0酸酶2(SGPP2)試劑盒 ，英文名： SGPP2 ELISA Kit

Mouse angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 小鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒

RatAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGS-ANA(Humangranulocytespecificainuclearaibody)ELISAKit人粒細胞特異性抗核抗體

細胞單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

RatoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)試劑盒

兔抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒

兔堿性0酸酶(ALP)試劑盒

兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)試劑盒

bFGF重組兔單克隆抗體

富含半胱與表皮生長因子樣蛋白1抗體

EDAR重組大鼠 EDAR 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GRP78(glucose regulated protein 78 0.5mgGRP78(glucose regulated protein 78) 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗原(熱休克蛋白70蛋白5)

ECE1重組人 ECE1 蛋白 Protein

HMGN3 Protein Human 重組人 HMGN3 蛋白

PLA2G2E Protein Mouse 重組小鼠 PLA2G2E 蛋白

Calu-1 細胞專用培養(yǎng)基GRP78(glucose regulated protein 78 0.5mgGRP78(glucose regulated protein 78) 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗原(熱休克蛋白70蛋白5)

HMGN3 Protein Human 重組人 HMGN3 蛋白

EDAR重組大鼠 EDAR 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PLA2G2E Protein Mouse 重組小鼠 PLA2G2E 蛋白

ECE1重組人 ECE1 蛋白 Protein